- الف- مقدمه1
- ب-چکيده3
-
- فصل اول:کليات 5
- 1- تاريخچه 6
- 2- خصوصيات کلي مايکوپلاسما6
- 3- مقاومت مايکوپلاسماها 8
- 4- طبقه بندي مايکوپلاسماها 9
- 5- طبقه بندي کلاستر مايکوئيدس12
- 6- فيلوژني14
- 7- ساختمان 15
- 1-7-ساختمان مايکوپلاسما مايکوئيدس 15
- 2-7- ساختمان مايکوپلاسما کاپري کولوم 17
- 8- بيولوژي مولکولي19
- 9- توالي‌هاي تکراري23
- 10- پروتئينهاي سطحي25
- 11- فاکتور حدت30
- 12- آناليز پروتئين 32
- 13- طبقه بندي سويه‌ها 34
- 14- مشخصات گونه مايکوئيدس35
- 15- کشت و رشد گونه مايکوئيدس 38
- 16- کشت و رشد گونه کاپري کولوم 41
- 1-16- محيط Thiacourt 41
- 17- بيماري پلوروپنوموني واگير گاوان44
- 1-17- علائم باليني 45
- 2-17- علائم کالبدگشايي بيماري 47
- 3-17- پاتوژنز 50
- 1-3-17- مکانيسمهاي مقابله با دستگاه ايمني53
- 4-17- اختصاصيت ميزبان57
- 5-17- انتقال بيماري 58
- 6-17- سير همه گيري 59
- 1-6-17- مخزن59
- 2-6-17- راه انتقال 59
- 7-17- پيشگيري و کنترل60
- 1-7-17- اقدامات لازم براي حفاظت مناطق عاري از بيماري61
- 2-7-17- اقدامات لازم هنگام شيوع بيماري62
- 3-7-17- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومي63
- 18- بيماري پلوروپنوموني واگير بزان 63
- 1-18- علائم باليني 64
- 2-18- علائم کالبد گشايي66
- 19- گونه مايکوپلاسما کاپريکولوم کاپريکولوم69
- 1-19- سندروم MASKePs70
- 2-19- علائم باليني71
- 3-19- علائم کالبد گشايي71
- 4-19- سندروم آگالاکتيه واگير73
- 20- گونه مايکوپلاسما کاپري 73
- 1-20- بيماريزايي 73
- 2-20- علائم کالبد گشايي74
- 21- سير همه‌گيري 75
- 1-21-مخزن 75
- 2-21-راه انتقال 76
- 3-21-جمعيت ميزبان 77
- 22-پيشگيري وکنترل77
- 1-22- اقدامات لازم براي محافظت مناطق عاري از بيماري 77
- 2-22- اقدامات لازم هنگام شيوع بيماري 78
- 3-22- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومي 78
- 23-واکسن 79
- 1-23-واکسن MmmLC79
- 2-23-واکسن Mccp79
- 3-23-واکسن Mcc79 79-اختصاصيت ميزبان در کلاستر مايکوئيدس 80
- 25-تشخيص افتراقي 80
- 1-25-شناسايي عامل بيماري زا 81
- 1-1-25-بررسي ميکروسکوپيک اگزوداي ريه از طريق تهيه اسمير يا برش بافتي 81
- 2-25- تشخيص آزمايشگاهي 81
- 1-2-25- روش کشت و جداسازي 81
- 1-1-2-25- انتخاب نمونه ها 82
- 2-1-2-25- آماده سازي نمونه ها 82
- 3-25- تستهاي بيوشيمي 83
- 4-25- روشهاي سرولوژي 85
- 1-4-25- عوامل موثر در آزمايشات سرولوژي 85
- 2-4-25- تست مهاري رشد87
- 3-4-25- تست ايمونو فلورسانس 88
- 4-4-25- تست رسوب ژلي 88
- 5-4-25- تست فيکساسيون کامپلمان 89
- 6-4-25- تست ممانعت از هماگلوتيناسيون 89
- 7-4-25- تست آگلوتيناسيون لاتکس 90
- 8-4-25- تست اليزاي رقابتي 91
- 9-4-25- ساير تستهاي تشخيصي 94
- 5-25 - مشکلات روشهاي سنتي 94
- 6-25- تشخيص با استفاده از PCR 95
-
- فصل دوم: روش کار
- 26- روش کار 101
- 1-26- جمع آوري نمونه 101
- 1-1-26- مواد لازم101
- 2-1-26- بخش جمع آوري نمونه101
- 3-1-26- نمونه برداري 103
- 2-26- کشت و جداسازي نمونه ها104
- 1-2-26- مواد لازم 104
- 2-2-26- طرز تهيه محيط کشت اختصاصي براي جداسازي مايکوپلاسماي نشخوار کنندگان 106
- 1-2-2-26- مواد لازم 106
- 2-2-2-26- روش تهيه محيط کشت107
- 3-26- استخراج DNA مايکوپلاسما109
- 1-3-26- روش استخراج DNA از نمونه هاي ارسالي109
- 4-26- فرايند PCR 110
- 1-4-26- مواد لازم 110
- 2-4-26- آماده سازي مواد جهت واکنش PCR 112
- 1-2-4-26- افزوده سازي DNA نمونه‌ها 112
- 2-2-4-26- افزوده سازي DNA کلونيهاي جدا شده115
- 3-2-4-26- تهيه مخلوط اصلي اوليه115
- 3-4-26- پرايمرها115
- 4-26- واکنش PCR117
- 5-26- تهيه ژل الکتروفورز 118
- 1-5-26- طرز تهيه محلول اتيديوم برمايد 119
- 6-26- الکتروفورز 121
- 7-26- رويت باندهاي ايجاد شده 122
-
- فصل سوم: نتايج
- 27- نتايج 124
- 1-27- جداسازي124
- 1-1-27- بررسي عملکرد محيط کشت124
- 2-1-27- نتايج کشت نمونه هاي ارسالي 124
- 1-2-1-27- نتايج روز پنجم 125
- 2-2-1-27- نتايج روزهفتم تا دهم125
- 3-2-1-27- نتايج روزپانزدهم126
- 2-27- نتايج PCR 126
- 1-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر جنس 126
- 2-2-27- تائيد کلوني هاي جدا شده127
- 3-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر کلاستر مايکوئيدس127
- 4-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر گونه آگالاکتيه128
- 5-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر گونه مايکوئيدس کلوني بزرگ129
- 3-27- نتايج کالبد گشايي130
- 1-3-27- معيار انتخاب 130
-
- فصل چهارم: بررسي نتايج
- نمودارها131
-
- فصل پنجم: بحث
- 28- بحث 139
- 1-28- ضايعات کالبد گشايي139
- 2-28- ميزان وقوع عفونت تنفسي مايکوپلاسما 141
- 3-28- روش کشت142
- 4-28- روش PCR 147
- 5-28- فراواني گونه ها 152
- 29- خلاصه انگليسي159
- 30- منابع 160
فهرست جداول
جدول1: طبقه بندي مايکوپلاسما 11
جدول 2: معرفي اعضا کلاستر مايکوئيدس و خصوصيات بيماريزايي آنها11
جدول 3: احتياجات غذايي براي رشد مايکوپلاسماهاي کلاستر مايکوئيدس 39
جدول 4 : مقادير موردنياز جهت تهيه مخلوط اصلي اوليه112
جدول 5: مواد مورد نياز واکنش تکثير 114
جدول6 : پرايمرهاي استفاده شده در واکنش تکثير 116
جدول 7 : برنامه واکنش پرايمرها 118
جدول8: : فرمول تهيه محيط TBE(5X)120
جدول9: ميزان اتيديوم برومايد مصرفي جهت ساختن مقادير متفاوت ژل 120
فهرست نمودارها
نمودار شماره 1: درصد مايکوپلاسماي جدا شده به روش کشت در عفونت تنفسي
گله‌هاي مورد مطالعه132
مطالعه به روشPCR 132
نمودار شماره3 : مقايسه روشهاي کشت و PCR در تشخيص مايکوپلاسما ي موجود در عفونت تنفسي گله‌هاي مورد مطالعه 133
نمودار شماره4: مقايسه نتايج کشت وPCR نمونه‌ها در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) 133
نمودار شماره 5: مقايسه نتايج کشت و PCR مايکوپلاسما در گاو (n=50) 134
نمودار شماره 6: مقايسه نتايج کشت و PCR مايکوپلاسما در گله هاي گوسفند (n=30) 134
نمودار شماره 7: مقايسه نتايج کشت و PCR در گله‌هاي بز (n=20) 135
نمودار شماره8: نمودار شماره 8:مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) 135
نمودار شماره 9: نمودار شماره9:مقايسه نتايج ايجاد کدورت در محيط براث و جداسازي مايکوپلاسما در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) 136
نمودار شماره 10: نمودار شماره10: مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCRمايکوپلاسما
در گله‌هاي گاو(n=50) 136
نمودار شماره 11: نمودار شماره 11:مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما
در گله‌هاي بز (n=20)137
نمودار شماره12: مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي گوسفند (n=30) 137